类器官培养中经典的细胞因子培养方案—WNER

R-Spodin 1/RSPO1

功能：

R-Spodin 1属于Wnt调节物的RSPO家族，该家族包括4个成员，即RSPO1-4。该家族是多个器官中维持成体干细胞的微环境因子。RSPO1是一种分泌型激活蛋白。RSPO1表达在发育中的中枢神经系统得某些区域，在肾上腺、卵巢、睾丸、甲状腺和气管中也有发现。RSPO1作为Wnt信号通路的激活剂，通过增强Wnt信号在多方面发挥作用。R-spondin-1 是 Lgr5 的配体，而 Lgr5 通常被认为是干细胞的标记物，Lgr5 阳性干细胞被证实具有自我更新和扩增成为类器官的潜能。通过 R-spondin-1 激活 Lgr5信号通路，可以促进胃、小肠等细胞的增殖。R-spondin-1/Lgr5 信号通路可以正向促进 Wnt 信号通路，以此促进肠道干细胞增殖和分裂，并有助于维持干细胞的表征。Wnt 依赖性信号通路通过维持 Lgr5 阳性干细胞的干性，同时 Wnt 非依赖性信号通路则通过抗凋亡的方式在肠类细胞的生长中共同发挥作用。R-spondin-1 作为 Wnt 信号通路的激活剂，通过增强 Wnt 信号在多方面发挥作用，在乳腺类器官、小肠类器官、肝脏类器官的发育生长过程中均有支持作用。

Wnt-3a

功能：

Wnt 家族共包含 19 个成员，如 Wnt-1、Wnt-3、Wnt-3A、Wnt-5A 等，在胚胎发育、组织再生、干细胞分化以及肿瘤发生过程中起到重要作用。Wnt-3A 作为 Wnt 家族成员之一，被认为是 Wnt/β-catenin 通路的激活因子，在细胞增殖、分化和凋亡过程中起关键作用。Wnt 信号通路通常包括以下 3 种途径，即经典 β-catenin 依赖性通路、β-catenin独立的 Wnt/ 平面细胞极性途径以及非经典 Wnt/Ca2+ 途径，其中经典的 β-catenin 依赖性途径被证实在多种干细胞的生长、增殖以及分化过程中发挥作用。通常认为，在 Wnt信号通路中，Wnt 可以与 Fz 受体以及 LRP5/6 受体结合形成复合物，以此保证 β-catenin 在细胞内得以积累并与细胞核内的 LEF/TCF 转录因子结合，从而启动 Wnt 信号通路下游靶基因 c-myc、cyclingD1 的转录过程，达到促进干细胞生长、增殖、分化和抑制凋亡的效果。

EGF

功能：

EGF是一种强效生长因子，可刺激多种上皮发育、血管生成、抑制胃酸分泌、成纤维细胞增殖和培养中表皮细胞的集落形成。EGF是EGF家族的创始成员，该家族还包括TGF-α、两调节蛋白（AR）、β细胞蛋白（BTC）、表胚蛋白（EPR）、肝素结合EGF-样生长因子（HB-EGF）、表观蛋白和神经调节蛋白（NRG1-6）。生理学上，EGF存在于各种体液中，包括血液、牛奶、尿液、唾液、精液、胰液、脑脊液和羊水。EGF是EGF受体（ErbB）的高亲和力配体，EGF结合并诱导EGF受体的二聚化，导致蛋白酪氨酸激酶信号通路的激活，从而转导EGF家族信号。在小肠类器官培养中，表皮细胞生长因子可以促进肠道的生长，表皮细胞生长因子信号通路在肠类器官生长中发挥重要作用。此外，表皮细胞生长因子对胶质瘤干细胞具有促进增殖的作用。