胶原杂交肽(CHP)是一种新颖的多肽,在体外和体内都能特异性地结合未折叠的胶原链。[1,2,3]通过共享天然胶原的Gly-X-Y重复序列,CHP具有通过改造三螺旋结构与变性胶原链杂交的强大能力以类似于DNA片段退火成互补DNA链的方式。chp是非常特异的:由于缺乏结合位点,它对完整的胶原分子的亲和力可以忽略不计,并且由于其中性和亲水性,它对非特异性结合是惰性的。
CHP是一种强大的组织病理学工具,可以直接检测多种疾病引起的炎症和组织损伤,以及在发育和豪老过程中的组织重塑。[3]CHP在三维胶原培养中有力地显示了癌细胞蛋白水解酶迁移引起的细胞周围基质转换,不使用合成的含氟基质或转基因细胞。[4]CHP可以在分子水平上测量和定位胶原组织的机械损伤。[5]它还可以评估去细胞外基质中的胶原变性。[6]此外,CHP可用于SDS-PAGE凝胶中胶原条带的特异性显示,无需蛋白印迹。
荧光F-CHP是一种常用于生物标记和荧光成像的荧光染料。它具有优良的荧光性能,包括强荧光信号和良好的光稳定性,适用于多种生物学应用。荧光F-CHP的化学结构使其在蛋白质、核酸和其他生物分子的标记中表现出色。这种荧光染料在细胞和分子生物学研究中广泛应用,可用于追踪生物分子的位置、运动和相互作用。由于其出色的性能和多功能性,荧光F-CHP在生命科学领域中扮演着重要的角色,为研究人员提供了强大的工具来探索生物体系的复杂性。
艾美捷荧光F-CHP直接在SDS-PAGE凝胶中可靠地测量I型胶原蛋白的稀释系列,并检测到含有少至5ng蛋白质的条带(左)。CHP可识别多种胶原类型(中),由于其中性和亲水性,对ECM(中)和细胞裂解液(右)中的非胶原分子没有亲和力。
用Typhoon Imager荧光成像记录(λex: 488 nm). .
此外,CHP可用于替代不成功的胶原抗体或常规胶原染色检测高度变性组织中的胶原蛋白[1]。 下图显示了完-全加热的猪韧带切片中完整的胶原含量,通过F-CHP或B-CHP可见(进一步通过酶标NeutrAvidin检测)。CHP染色对胶原蛋白的特异性比传统的胶原蛋白染色(如Sirus Red)更高,后者依赖于胶原蛋白结合的正电荷,可以对其他碱性氨基酸含量高的蛋白质进行非特异性染色。
荧光F-CHP文献参考:
[1]Targeting and mimicking collagens via triple helical peptide assemblies.Current Opinion in Chemical Biology,2013,17,968-975.
[2]In situ imaging of tissue remodeling with collagen hybridizing peptides.ACS Nano,2017,11,9825-9835.
[3]Targeting collagen strands by photo-triggered triple-helix hybridization.Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America,2012,109,14767-14772.
[4]Visualizing collagen proteolysis by peptide hybridization:From 3D cell culture to in vivo imaging.Biomaterials,2018,183,67-76.
[5]Direct detection of collagenous proteins by fluorescently labeled collagen mimetic peptides.Bioconjugate Chemistry,2013,24,9-16.
[6]Molecular level detection and localization of mechanical damage in collagen enabled by collagen hybridizing peptides.Nature Communications,2017,8,14913,doi:10.1038/ncomms14913.
本文地址: https://www.xsyiq.com/51591.html
网站内容如侵犯了您的权益,请联系我们删除。